Toward to establish selection criteria for rapid serological tests for COVID-19 / Hacia la construcción de criterios para la selección de pruebas serológicas rápidas para COVID-19

COVID-19, the new pandemic is associated to SARS-CoV-2 virus infection. Social distancing and the testing have been the principal measures that have shown to be effective for the reduction of critical cases. Although the gold standard for diagnosis of COVID-19 is the RT-PCR, rapid serological tests could also be used for prevalence studies, and for epidemiological monitoring. In order to characterize the humoral immune response, we analyzed eight immunochromatographic test and one ELISA test, as a verification or secondary validation analysis used positive and negative control serum samples. Sera from negative and positive individuals [asymptomatic or symptomatic individuals, outpatient or inpatientor (intensive care unit)] were analyzed, and the following results were found: of all these rapid tests, only 4 exhibit clear banding patterns for IgG and two of these also showed results for IgM (only in a few symptomatic patients). Instead, with an ELISA test a preferential recognition was observed for symptomatic patients who were critically ill, whereas in asymptomatic individuals it did not show more than 25% of positivity. Understanding and validating molecular and serological tests are an essential component for the design of public health measures to response to the pandemic.

COVID-19 la nueva pandemia está asociada con la infección por el virus SARS-CoV-2. La distancia social y el análisis masivo de muestras son las principales medidas que se han mostrado efectivas para la reducción de los casos críticos. Aunque el estándar de oro para el diagnóstico de COVID-19 es la RT-PCR, las pruebas serológicas rápidas podrían también ser usadas en estudios de prevalencia, así como en la vigilancia epidemiológica. Con el fin de caracterizar la respuesta inmune humoral, analizamos ocho pruebas inmunocromatográficas y una prueba de ELISA, en un proceso de verificación de desempeño o validación secundaria, usando sueros control positivos y negativos. Los sueros de pacientes positivos y negativos [individuos asintomáticos o sintomáticos, pacientes ambulatorios u hospitalizados (en cuidados intensivos)] fueron analizados, encontrando los siguientes resultados: de todas las pruebas rápidas examinadas solamente 4 mostraron un claro patrón de bandas para IgG, de éstas, dos de ellas también mostraron resultados para IgM (solamente en pocos pacientes sintomáticos). En cambio, con la prueba de ELISA un reconocimiento preferencial fue observado en pacientes sintomáticos con enfermedad crítica, mientras que los individuos asintomáticos no mostraron más de un 25 % de positividad. Comprender y validar las pruebas serológicas son componentes esenciales en el diseño de las medidas de políticas públicas como respuesta a esta pandemia.

Perinatal outcomes in pregnant women with heart disease: Hospital General León experience

Background: Pregnancies in patients with heart disease are often complicated. The prevalence in our country is at 0.1 to 4%. An increase in the morbidity and mortality of pregnant patients with heart disease was observed, so it is recommended to evaluate the maternal risk with the WHO Classification. The objective of the study was to determine adverse outcomes; cardiac, obstetric and fetal/neonatal.Methods: We retrospectively studied all pregnancies of women with heart disease that were presented on an outpatient basis in the period of 4 years at the General Hospital of León and maternal, obstetric and fetal/ neonatal outcomes were reviewed.Results: In our study population, no maternal or fetal mortality was observed. Of 16 pregnancies of patients with heart disease were complicated by adverse cardiac events (2 of 16), obstetric (9 of 16), fetal/ neonatal (6 of 16). Hospitalization was required during the pregnancy of 11 patients. WHO class IV was the only group in which there were adverse cardiac events. 12 pregnancies were interrupted abdominally. Low fetal growth curve was observed in 6 of the 16 patients.Conclusions: Pregnancies in patients with heart disease have a high risk of cardiac, obstetric and fetal / neonatal complications. Therefore, preconceptionally counseling and specialized multidisciplinary management should be offered to reduce perinatal morbidity and mortality.

Preliminary study to characterize differences in potential immunomodulatory effects of cyclosporine A using BALB/c and ICR mouse splenocytes / Estudo preliminar para caracterizar as diferenças nos efeitos imunomodulatórias de ciclosporina A esplenócitos usando BALB / c e ICR do mouse

Cyclosporine A (CsA) is widely used as an immunosuppressant for the treatment of autoimmune diseases and immune regulation in transplant patients. Due to its wide applicability, studies of unwanted side effects of CsA are imperative. It has been found that not all patients treated with CsA display the same types/patterns of adverse effects. To ascertain the bases for these differential responses, potential differing effects of CsA on B-lymphocytes were analyzed. This entailed an assessment of changes in CsA viability and mitotic activity within splenocyte populations from BALB/c and ICR mice. These particular strains were examined because: (1) in each of them, previously have been shown that differed in the respond to biological response modifiers, such as bacterial agents, and/or immunogens; (2) our own earlier studies showing strain-associated differences in ex vivo splenocyte/lymphocyte responses to other drug; and, (3) a potential immunomodulatory effect of any agent should be studied in at least two different strains during a broad toxicological evaluation. Splenocytes from each strain were treated with 200 μg/mL CsA, and CD4+, CD8+, and CD19+ cell viabilities were monitored at various time points during the exposure period. In general, there appeared to be a trend toward greater decreases in viability among BALB/c B-lymphocytes than their ICR counterparts as incubation progressed. Differences related with T-lymphocyte sensitivity to drug associated to strains was not observed, because it was uniformly lethal throughout. With regard to mitotic activity, cells from ICR mice were more susceptible to inhibition of spontaneous cell division at low concentrations of CsA (relative to the rates of blastogenesis by BALB/c counterparts). At higher concentrations of the drug however, there were no differences in the sensitivity of each strain. This work provides new insight into the mechanism of action of CsA and illustrates the need for at least two different strains of mice/rodents for the evaluation of the overall toxicological potential of any test agent.

Ciclosporina A (CsA) é amplamente usada como imunossupressor para o tratamento de doenças autoimunes e regulação imune nos pacientes transplantados. Devido à alta aplicabilidade, são imperativos os estudos sobre seus efeitos colaterais indesejáveis. Descobriu-se que nem todos os pacientes tratados com CsA apresentam os mesmos tipos/padrões de efeitos adversos. Para averiguar as bases dessas respostas diferentes, analisaram-se efeitos potenciais diferentes da CsA nos linfócitos B. Isto envolveu a avaliação de alterações na viabilidade da CsA e da atividade mitótica dentro das populações de esplenócitos de camundongos BALB/c e ICR. Essas espécies, em particular, foram examinadas porque: (1) cada uma delas mostrou, previamente, respostas diferentes a modificadores de respostas biológicas, tais como agentes bacterianos e/ou imunogênicos; (2) nossos estudos anteriores mostraram diferenças associadas às espécies em respostas ex vivo de esplenócitos/linfócitos a outro fármaco e (3) qualquer efeito imunomodulatório potencial de um agente em teste deveria ser estudado, no mínimo, em duas espécies diferentes durante a avaliação toxicológica ampla. Esplenócitos de cada espécie foram tratados com 200 μg/mL de CSA e a viabilidade das células CD4+, CD8+ e CD19+ foi monitorada em vários tempos durante o período de exposição. No geral, parece haver uma tendência em relação a aumentos maiores na viabilidade entre os linfócitos B de BALB/c do que no de ICR, à medida que a incubação progride. Não se observou diferenças na sensibilidade do linfócito T, uma vez que o fármaco foi uniformemente letal. Com relação à atividade mitótica, as células de camundongos ICR se mostraram mais suscetíveis à inibição da divisão celular espontânea em baixas concentrações de CsA (relativamente às taxas de blastogênese de BALB/c). Em concentrações maiores do fármaco, entretanto, não houve diferenças na sensibilidade em cada uma das espécies. Este trabalho propicia nova visão do mecanismo de ação de CsA e ilustra a necessidade de, pelo menos, duas espécies diferentes de camundongos/roedores para a avaliação da toxicidade potencial de qualquer agente em teste.

Evaluación de la actividad citotóxica y leishmanicida de extractos y fracciones de Piper cumanense y Piper holtonii / Evaluation of the cytotoxic and leishmanicidal activity of extracts and fractions of Piper cumanense and Piper holtonii

Especies del género Piper son reportadas como promisorias para el tratamiento de enfermedades tropicales. Este estudio evalúa la actividad citotóxica y leishmanicida de extractos y fracciones de diferente polaridad obtenidas de las especies vegetales Piper cumanense (P. cumanense) y Piper holtonii (P. holtonii); se emplearon macrófagos murinos J774 y promastigotes de Leishmania panamensis MHOM/CO/87/UA140. La fracción hexánica (PcH) presentó un efecto leishmanicida con una selectividad de 2 en los modelos in vitro empleados. Esta selectividad permite sugerir una potencial actividad antileishmanial, que amerita seguir siendo explorada.

Piper genus’ species are reported as promissory as tropical diseases treatment. This research showed the cytotoxic and leishmanicidal activity of extracts and fractions of different polarity derived from Piper cumanense (P. cumanense) and Piper holtonii (P. holtoni) on murine macrophages J774 and L. panamensis promastigotes (MHOM/ CO/87/UA140). Hexanic fraction (PcH) exhibited leishmanicidal effect with 2-fold index selectivity in this in vitro model used. These results suggest a potential antileishmanial activity which should be more studied.

Evaluación in vitro de la actividad de aceites esenciales de plantas colombianas sobre Leishmania braziliensis / In vitro evaluation of essentials oils activity from Colombians plants on Leishmania braziliensis

Las leishmaniosis son zoonosis que en el hospedero humano pueden afectar la piel, las mucosas o las vísceras, resultado del parasitismo de los macrófagos por un protozoario flagelado del género Leishmania, introducido al organismo por la picadura de un insecto flebótomo. En Colombia, la leishmaniosis cutánea es causada por parásitos del subgénero Viannia, al cual pertenecen las especies Leishmania (L) panamensis, L. braziliensis y L. guyanensis. El tratamiento clínico requiere la administración de medicamentos que, si bien son efectivos, generan efectos adversos en el individuo. Además, se ha detectado una resistencia del parásito, lo que ha favorecido la disminución de la eficacia de los tratamientos usados convencionalmente para controlar la enfermedad. En la búsqueda de nuevas y más seguras alternativas terapéuticas, los productos naturales son una fuente importante de agentes con potencial actividad antileishmanial. Éste es el caso de los aceites esenciales que por sus características físico-químicas, principalmente por su untuosidad, pueden constituirse en una alternativa tópica para el control de la leishmaniosis cutánea (lc). En este estudio, la actividad antileishmanial de trece aceites esenciales de diferentes familias de plantas colombianas (Lauraceae, Rutaceae, Verbenaceae, Lamiaceae, Zingiberaceae, Myristicaceae, Cardiopteridaceae y Pinaceae) se evaluó sobre los promastigotes de L. braziliensis. Si bien, es necesaria la valoración del efecto citotóxico que sobre los macrófagos, como células blanco de la infección por Leishmania, puedan generar estos aceites; resulta promisoria la actividad antileishmanial directa sobre las formas promastigotes, la cual puede ser comparable con la observada para pentamidina, fármaco que a diferencia de las sales antimoniales pentavalentes, no es una prodroga que requiera ser descompuesta en metabolitos activos una vez es incorporada al macrófago.

Leishmaniasis is zoonosis that in human host can affect skin, mucosa and viscera, when a flagelar protozoo is phagocyted by macrophages after bit of Phlebotomineo insect. In Colombia, cutaneous leishmaniasis is produced by subgenus Viannia parasites, genus that includes species like Leishmania panamensis (L), L. braziliensis y L. guyanensis. Clinical treatment requires the administration of effective drugs that induce severe adverse effects in the patient treated. Additionally, the parasite had generated a drug-resistance, which promotes a reduction in this kind of therapeutic schedule. In the searching of new and safer therapeutics alternatives to leishmaniasis control, natural products are a important source of active molecules with pharmacological activity. In this study we reported the antileishmanial activity of 13 essentials oils of different Colombians plants (Lauraceae, Rutaceae, Verbenaceae, Lamiaceae, Zingiberaceae, Myristicaceae, Cardiopteridaceae y Pinaceae) using L. braziliensis promastigotes. The effective concentration 50 (EC50) was 87,8 +/- 55,51 μg/mL, 265,5 +/- 7,5 μg/mL and 17,4 +/- 0,43 μg/mL for essentials oils of Persea caerulea fruit, Lippia alba leaves and Rosmarinus officinalis leaves, respectively, which permit suggest us, a parasitocide property. Although, it is necessary the cytotoxic effect study on macrophages as infection target cells, result promissory the antileishmanial effect direct to promastigote form, which can be comparable with the effect observed to pentamidine, drugs to a difference of antimonial drugs, is not a prodrug that require to be metabolized into macrophage. In other words, essentials oils would contain active principles lethal against free forms and maybe, against intracellular Leishmania spp forms that need further studies to be considered as therapeutic alternative to leishmaniasis cutaneous control.

Modulación de la diferenciación de células dendríticas por antígenos tumorales pulmonares / Modulation of dendritic cell differentiation by lung tumor antigens

El cáncer es, en la actualidad, un serio problema de salud pública en el ámbito mundial. Una de las aproximaciones más exploradas desde hace cerca de veinte años, es la inmunoterapia con células dendríticas (CD), células presentadoras de antígenos (CPA) profesionales. No obstante, los resultados de los estudios clínicos que emplean CD autólogas pulsadas con antígenos tumorales no han sido tan exitosos como se proyectaba. Una de las hipótesis propuestas que justifique la eficacia tan variable en los protocolos terapéuticos, es la inducción de tolerancia en las CD por los antígenos tumorales y la subsecuente baja actividad de las células efectoras (linfocitos T CD8+, CD4+ y Natural Killer). En este trabajo se evidencia que los antígenos tumorales provenientes de un adenocarcinoma pulmonar favorecen la reaparición de co-receptores como el CD14, conocido marcador de inmadurez en CD. Esto sugiere que en algunos aspectos las CD expuestas a tales antígenos, muestran defectos en la diferenciación. Como se sabe, las CD inmaduras tienen una potencia estimuladora mucho menor sobre las células efectoras, comparativamente con las CD de fenotipo maduro. Sin embargo, antígenos provenientes de la línea comercial A549 (adenocarcinoma) no produjeron cambios similares en la maduración de CD. Ello resalta la necesidad de caracterizar la respuesta individual in vitro al planear una terapia basada en CD, a fin de tener mayor probabilidad de éxito en el tratamiento.

Cancer is currently a very serious public health problem worldwide. Dendritic cell (DC) based immunotherapy has been one of the most active research fields during the last 20 years. However, results of several studies, mainly involving tumor antigen pulsed autologous DCs, have not been as successful as expected. Induction of a tolerant behavior of DCs upon the contact with tumor derived antigens is one of the hypotheses proposed since other effector cells like CD8+, CD4+ T lymphocytes and Natural Killers, would be rendered to a non-responsive state seriously impairing tumor growth control. In this work we found additional evidence about a likely DC differentiation defect caused by lung adenocarcinoma specific antigens freshly obtained from a patient, as suggested by the presence of the co-receptor CD14 on the surface of mature DCs (CD14 is a known marker for initial stages of DC differentiation). Our results confirm that some aspects in tumor antigen treated DCs resemble their immature phenotype, largely less efficient presenting cells, and very weak immune response inducers. Interestingly, tumor antigens obtained from the lung adenocarcinoma derived A549 cell line were unable to cause the same effect. This highlights the requirement for a complete characterization of the functional nd phenotypic individual conditions when planning a DC based immunotherapy in order to have good success likelihood at cancer patient’s treatment.

Células dendríticas (CDs) diferenciadas a partir de monocitos humanos como herramienta para el estudio de agentes antileishmaniales / Dendritic cells from human monocytes: as a tool to study antileishmanials agents

Las células dendríticas son consideradas potentes células presentadoras de antígeno, fundamentales para el inicio y desarrollo de una respuesta inmunitaria efectiva frente a diversos agentes infecciosos. El estudio de la interacción parásito-células dendríticas, es esencial para la evaluación y desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas profilácticas capaces de controlar de una manera segura y efectiva el agente patógeno, si se tiene en cuenta que diferentes agentes patógenos (ej: parásitos perteneciente al genero Leishmania) pueden afectar la maduración y función de las células dendríticas, como uno de los principales mecanismos de evasión de la respuesta. En el presente estudio, nosotros determinamos que las células dendríticas derivadas de monocitos de sangre periférica humana diferenciadas luego de 72 horas de cultivo en presencia de interleuquina 4 y factor estimulador de colonias granulocito/macrófago, pueden ser utilizadas exitosamente para la evaluación de la actividad anti-leishmanial e inmuno-moduladora de nuevas formulaciones terapéuticas para el control de la leishmaniosis.

Cuantificación por citometría de flujo de esplenocitos CD4+, CD8+, CD19+ y CD14+ obtenidos de cuatro especies murinas empleadas en estudios de inmunotoxicología / Quantification by flow cytometry of CD4+, CD8+, CD19+ and CD14+ mouse splenocytes, obtained from four species used in Immunotoxicology´s studies

Los modelos experimentales en particular el modelo murino, han sido ampliamente utilizados en el estudio del potencial inmunotóxico de fármacos, especialidad hoy en día conocida como inmunotoxicología (IMT). La caracterización de los componentes, su función, sus interacciones y sus mecanismos efectores, es fundamental al momento de estudiar la capacidad inmunomoduladora de cualquier molécula. Dentro de los elementos celulares responsables de la función efectora adaptativa y asociados con buena parte de los efectos adversos que sobre el sistema inmune pueden inducir los fármacos están los linfocitos T ayudadores, citotóxicos y B, al igual que los monocitos, los cuales pueden ser monitoreados por citometría de flujo utilizando anticuerpos fluoromarcados que reconocen las sub-poblaciones CD4+, CD8+, CD19+ y CD14+, respectivamente. Nosotros establecimos intervalos de referencia para estas poblaciones celulares obtenidas del bazo de ratones CFW, Suizos, ICR y Balb/C, como algunas de las especies más utilizadas en pruebas de IMT. Aunque hoy en día se sabe que la caracterización de rasgos fenotípicos de una población, debe siempre acompañarse se estudios funcionales, para algunos casos clínicos de inmunosupresión secundaria a la administración de fármacos, el simple estudio fenotípico puede ser concluyente. Por esta razón, los valores de referencia aquí establecidos, son un referente preliminar importante que permite establecer el perfil inmunosupresor de una molécula con potencial farmacéutico, estudiada en el concepto integral de seguridad

Análisis de las complicaciones más frecuentes de la cirrosis hepática en nuestro medio / Analysis of the complication frequence of the cirrhosis hepatic in means

Conocer las principales causas de cirrosis hepática (CH) en nuestro medio. Analizar la relación entre edad, sexo, etiología y parámetros hematológicos: albúmina (Alb), tiempo de protrombina (PT) y bilirrubina (BT) con las causas de descompensación de la CH. Se evaluó parámetros: clínicos, hematológicos, endoscópicos, ecográficos y en algunos casos histológicos de la base de datos de la consulta de hepatología del Hospital IVSS "Dr. Miguel Pérez Carreño" establecida desde diciembre de 1999. Se utilizó la escala de Child-Pugh en los casos con cirrosis hepática compensada (CHC); la cirrosis hepática descompensada (CHC) se definió por la presencia de algunas de las complicaciones: Ascitis (A), Encefalopatía (E), Hemorragía Digestiva Superior (HDS) y Peritonitis Bacteriana Espontánea (PBE). Se estableció factores pronósticos de descompensación: edad, sexo, Alb, PT, BT. Análisis estadístico: se utilizó medidas de tendencia central, frecuencias absolutas y relativas, medidas de asociación y comparación. Se obtuvo 80 casos de los cuales el 55 por ciento (n=44) perteneció al sexo masculino con un promedio (X) de edad de 53 años, y el 45 por ciento (n=36) restante al femenino con un X de edad de 50 años. La etiología más frecuente de CH fue por alcohol (ETOH) en un 31,3 por ciento (n=25), seguido de infección viral (VHC) en un 17,5 por ciento (n=14). La principal complicación fue la (A) entre los casos con CHD en un 26,25 por ciento (n=21), seguido de la (HDS) con 6,25 por ciento (n=5). Los hallazgos endoscópicos resultantes: varices esofágicas y la gastropatía hipertensiva con 45 y 24 casos respectivamente; mientras que los ecográficos: esplenomegalia en 34 casos, seguido de enfermedad hepática difusa con 32 casos. Hubo un 3,75 por ciento de muertes en 30 meses de seguimiento. La causa más frecuente de CH en nuestro medio es el alcohol siendo la princiapl complicación la ascitis, algunos parámetros hematológicos guarda relación con la misma

Cambios psicomotrices secundarios a la exposición de residuos anestésicos inhalados / Psychomotor chnges secundaries to trace inhalated anesthetic exposition

Se aplicó una batería de 5 pruebas para detectar las posibles alteraciones en las funciones psicomotoras en el personal expuesto a residuos anestésicos: A).- Médicos Residentes con menos de dos años de contacto con anestésicos. B).- Médicos con más de dos años de exposición. C).- Un grupo de Médicos no expuestos. Simultáneamente se determinó un muestreo de residuos anestésicos en las áreas de trabajo y en la sangre venosa de los sujetos de los tres grupos. Encontrándose modificaciones psicomotoras de percepción, en el razonamiento abstracto y en las destrezas, pudiéndose correlacionar con las concentraciones de halogenados en sangre venosa y del medio ambiente.